Dissertação

Cell Adhesion and Nuclear Morphology Analysis from DAPI Staining Fluorescence Microscopy Images EVALUATED

A adesão celular é um mecanismo crucial na formação e manutenção de padrões tridimensionais de células em tecidos epiteliais. A perda de adesão celular aumenta o risco de invasão celular dos tecidos adjacentes e metástases induzido também alterações no arranjo do citoesqueleto e consequentemente, modificações na forma e polaridade das células. Alterações nas proteínas epiteliais E- e P-caderinas, que são as duas maiores contribuintes para estes fenómenos, estão tipicamente associadas com tipos invasivos de cancros do estômago e da mama. Neste trabalho, o estudo do estado de adesão de culturas celulares derivadas de cancros da mama e gástrico foi realizado através de imagens de microscopia de fluorescência com corante DAPI. Usando estas imagens, características da rede intercelular e morfológicas dos núcleos foram analisadas e quantificadas. Foi ainda desenvolvido um método para estudar se e de que forma a adesão celular e as alterações nucleares influenciam a progressão do ciclo celular em linhas celulares mutadas. Através das imagens de microscopia de fluorescência com corante DAPI, verificou-se que a informação obtida pelas distâncias entre núcleos, áreas e a heterogeneidade das redes intercelulares podem ser usadas para inferir o estado de adesão celular, bem como características as nucleares morfológicas, principalmente a área dos núcleos. A informação dos núcleos obtida permitiu ainda a obtenção de dados relativos à fase do ciclo celular. O método desenvolvido, quando comparado com outros sistemas bioquímicos como o sistema FUCCI, revelou uma exactidão de 89% e uma pureza de 79%.
Adesão Celular, Rearranjo do citoesqueleto, Microscopia de Fluorescência com DAPI, Rede Intercelular, Morfologia Nuclear, Estágios do Ciclo Celular

Junho 17, 2015, 14:0

Publicação

Obra sujeita a Direitos de Autor

Orientação

ORIENTADOR

Maria Raquel Campos Seruca

IPATIMUP

Doutora

ORIENTADOR

João Miguel Raposo Sanches

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Auxiliar