Dissertação

Describing monolayer mechanoresponse from nuclear morphology and dynamics: a computational approach EVALUATED

As células exibem respostas complexas a estímulos mecânicos, que ainda não são completamente compreendidas. Descrever a forma como células com mecanotransdução deficiente podem afetar células vizinhas, e como este efeito se propaga numa monocamada celular, pode elucidar sobre mecanismos de estabilidade celular e interações célula-célula, com impacto no estudo de condições como laminopatias ou invasão em cancro. Aqui, células NRK-52E transfectadas com lamin A Del50, cujo efeito inclui o aumento da rigidez nuclear, foram colocadas numa monocamada de células NRK-52E normais, não transfectadas. Através de análise morfométrica e rastreamento, os núcleos, que possuem um papel central na resposta a estímulos mecânicos, são caracterizados e comparados com os de uma monocamada controlo. Foi desenvolvido um método que permite uma análise detalhada do aspeto espacial e progressão temporal do contorno nuclear, utilizado para a obtenção de uma descrição completa do fenótipo e dinâmica das monocamadas sob estudo. Os resultados da análise revelam que as células são extremamente sensíveis à presença de vizinhos com resposta mecânica comprometida, provocando uma perda de coordenação generalizada na migração celular e a diferenças significativas na morfologia nuclear, sem no entanto parecer afetar a dinâmica das flutuações da membrana nuclear. Curiosamente, foram observados efeitos dependentes da distância a uma célula comprometida, indiciando um comportamento compensatório que pretenderá dar resposta a defeitos mecânicos numa monocamada em equilíbrio.
análise de bioimagens, mecanotransdução, morfometria nuclear, dinâmica de monocamadas, HGPS

Janeiro 28, 2021, 16:0

Documentos da dissertação ainda não disponíveis publicamente

Orientação

ORIENTADOR

Kris Noel Dahl

Carnegie Mellon University

Associate Professor

ORIENTADOR

João Miguel Raposo Sanches

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Associado