Dissertação

Bio-functionalization of microcarriers for human neural stem cell expansion EVALUATED

A necessidade de estabelecer uma fonte ilimitada de células estaminais neurais para aplicação em investigação científica e em terapias clínicas é a base para o desenvolvimento de bioprocessos eficientes de larga escala. O uso de micropartículas, que proporcionam uma superfície para as células aderirem em suspensão, em conjunto com bioreactores é uma possível estratégia. Existem várias micropartículas disponíveis comercialmente, no entanto, ainda existe uma grande necessidade de desenvolver micropartículas adequadas à expansão de linhas celulares específicas. Este trabalho centrou-se na funcionalização da superfície das micropartículas para melhorar a adesão e proliferação de uma linha particular de células estaminais neurais (lt-NES), quando cultivadas em condições dinâmicas. Micropartículas funcionalizadas com laminina, quer através de uma reacção de ligação covalente (EDC/NHS) quer por adsorção passiva, foram comparadas em condições estáticas. Com base nos resultados obtidos, as micropartículas adsorvidas ou ligadas covalentemente à laminina foram testadas em sistemas agitados (spinner flasks). As partículas conjugadas covalentemente com laminina promoveram a adesão e o crescimento celulares em condições estáticas, mas resultados semelhantes não foram observados no spinner flask. As partículas adsorvidas com laminina revelaram ser mais eficientes na cultura das lt-NES em sistema agitado, resultando num fold increase de 1.5. Além disso, verificou-se a manutenção das propriedades fenotípicas das lt-NES expandidas nesse último sistema de cultura, através da expressão de marcadores neuronais tais como a Nestina e o Sox2. Os resultados obtidos neste trabalho poderão servir de base a futuras optimizações dos parâmetros de cultura para a expansão de lt-NES.
Micropartículas, Células Estaminais Neurais, Reacção EDC/sulfo-NHS, Adsorpção

Dezembro 7, 2015, 10:30

Publicação

Obra sujeita a Direitos de Autor

Orientação

ORIENTADOR

Frederico Castelo Alves Ferreira

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Auxiliar

ORIENTADOR

Carlos André Vitorino Rodrigues

iBB - Instituto de Bioengenharia e Biociências / Instituto Superior Técnico

Doutor