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Dissertação

Serum-free and Feeder-free Expansion of a patient-specific Fanconi Anemia Human Induced Pluripotent Stem Cell (hiPSC) line corrected by gene editing EVALUATED

Detalhes: As células estaminais pluripotentes induzidas humanas (hiPSC) apresentam a vantagem de poderem ser obtidas a partir de células somáticas de qualquer indivíduo. Quando obtidas a partir de um individuo afetado por uma doença genética, as iPSCs podem ser usadas para recapitular os efeitos dessa mesma doença permitindo a sua modelação bem como a pesquisa de novos fármacos. As células obtidas desta forma podem também ser usadas para terapia celular após a devida correção genética. Neste estudo, foram usadas como modelo células hiPSC geneticamente corrigidas obtidas a partir de um doente com Anemia de Fanconi, graças a uma colaboração com a Divisão de Terapias Hematopoiéticas Inovadoras em Madrid, Espanha. Esta doença genética é definida por uma marcada predisposição para o cancro e eventualmente falência da medula óssea. Foi possível definir um protocolo que permitiu a expansão desta linha celular num meio de cultura quimicamente definido (mTeSR1) e usando Matrigel como substrato de adesão. Foi possível expandir as células até cerca de seis vezes o seu valor inicial durante oito dias de cultura. Após expansão, as células mostraram uma expressão normal dos marcadores de superfície (Tra-1-60, Tra-1-81, SSEA-4) bem como dos factores de transcrição (Nanog, Sox-2, Oct-4). Para além disso as células mostram expressão normal de marcadores de células neurais (Pax6 e Nestin) após serem submetidas a um protocolo de diferenciação em linhagem neural. Foi possível demonstrar que a expansão da linha celular modelo é possível e, recorrendo ao uso de materiais de grau GMP, poderão então ser usadas para aplicações clínicas.
Keywords: Células estaminais induzidas, Anemia de Fanconi, expansão celular, terapia celular, modelação de doenças

Discussão: dezembro 2, 2015, 10:0