Dissertação

Hypoxia in a 3D in vitro Spheroid Model: the role on Tumor Progression and Response to Chemotherapy EVALUATED

O Cancro é a principal causa de mortalidade no mundo, com aproximadamente 8.2 milhões de mortes em 2012. Melhores plataformas são necessárias para o desenvolvimento de fármacos de forma a melhorar a sua taxa de sucesso em ensaios clínicos. Das características do microambiente tumoral, a hipóxia está presente em 90% dos tumores sólidos e correlaciona-se com cenários desfavoráveis em pacientes, possivelmente devido a quimiorresistência. Neste trabalho, um modelo 3D in vitro foi usado para estudar a influência da hipóxia em esferóides de células tumorais MDA-MB-231. A hipóxia promoveu progressão tumoral, mostrando maior proliferação e um modo de invasão mais persistente. A expressão de seis genes associados aos HIFs foi analisada sob hipóxia, sendo três vezes superior para PLOD2, P4HA1, LDHA e PDK1. Paralelamente, estudos de knock down dos HIF-1 e HIF-2 mostraram distâncias invadidas e níveis de proliferação inferiores sob hipóxia. Juntos, estes dados sugerem que existe regulação pelos HIFs neste sistema. Curvas IC50 foram construídas baseadas em proliferação e distância invadida para estudar quimiorresistência contra Paclitaxel e Doxorrubicina. Ambos os IC50 foram maiores sob hipóxia para os dois fármacos, mostrando quimiossensibilidade. Esferóides hipóxicos sujeitos a baixas concentrações de Paclitaxel mostraram maior progressão que o controlo normóxico sem fármaco, sugerindo quimiorresistência. Estudos análogos foram conduzidos em 2D e revelaram IC50 inferiores, mostrando a importância do ambiente 3D para a quimiorresistência promovida pela hipóxia. Este trabalho pode potencialmente descrever o efeito da hipóxia na quimiorresistência in vivo, salientando a necessidade de entender a influência do microambiente na progressão tumoral.
Cancro da Mama, Hipóxia, Modelos 3D in vitro, Esferóide, Quimiosensibilidade, Quimiorresistência.

Novembro 12, 2015, 14:0

Publicação

Obra sujeita a Direitos de Autor

Orientação

ORIENTADOR

Denis Gaston Wirtz

Johns Hopkins University

Doutor

ORIENTADOR

Nuno Filipe Santos Bernardes

iBB - Instituto de Bioengenharia e Biociências / Instituto Superior Técnico

Doutor