Dissertação

Hepatocyte Differentiation of Induced Endodermal Progenitor Cells compared to Human Embryonic Stem Cells EVALUATED

A capacidade de diferenciar células estaminais embrionárias humanas (hESCs) em hepatócitos (HLCs) permite estudar o desenvolvimento biológico do fígado, testar medicamentos e facilita o desenvolvimento de terapias celulares para tratamento de doenças. No entanto, o uso destas células acarreta diversas desvantagens, como imunorejeição, problemas éticos e o risco de formar teratomas. A procura de fontes alternativas para obter HLCs levou à ideia de usar 14 factores de transcrição (TF) para reprogramar células adultas progenitoras multipotentes (hMAPCs) em células progenitoras endodermais induzidas (células iEndo). Estas células são caracterizadas pela expressão de genes da mesendoderm/endoderme, bem como pela sua capacidade de serem expandidas longo termo e de se diferenciarem em células da linhagem endodermal. Neste estudo, avaliou-se a capacidade de diferenciação das células iEndo (mantendo-as em diferentes meios de expansão e protocolos) em hepatócitos e compararam-se os resultados com os obtidos na diferenciação de hESCs. Provou-se que manter as células no meio hMAPCs (contendo soro) e diferenciando-as usando protocolos que começam no dia 8 (aFGF) ou no dia 12 (HGF) do protocolo das hESCs resultou nas diferenciações mais eficientes. Embora a diferenciação das hESCs tenha levado a hepatócitos mais maduros, em ambos os casos os HLCs tinham a morfologia de hepatócitos, expressaram genes característicos de hepatócitos maduros (Albumina/AAT) e secretaram albumina. No entanto, estas células ainda expressaram genes de hepatócitos fetais (AFP) e não mostraram actividade de CYP3A4. Conclusão: A diferenciação de células iEndo derivadas de hMAPCs em HLCs é um método alternativo, mas menos eficiente do que a diferenciação de hESCs.
Células Estaminais Embrionárias, CélulasAdultas Progenitoras Multipotentes, CélulasProgenitoras Endodermais Induzidas, Diferenciação, Hepatócitos

Outubro 30, 2015, 10:0

Publicação

Obra sujeita a Direitos de Autor

Orientação

ORIENTADOR

Manoj Kumar

KU Leuven

Doutor

ORIENTADOR

Maria Margarida Fonseca Rodrigues Diogo

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Auxiliar