Dissertação

Towards the continuous production of bacterial metabolites in microfluidic environment EVALUATED

Neste trabalho, um microreactor contínuo foi concebido para estudar o efeito de miniaturização em bioreactores para a produção de invertase a partir de S. cerevisiae MM01 em ambiente microfluídico. De modo a simplificar a análise, e considerando também as estratégias típicas de produção de enzimas à escala laboratorial, vasos com chicanas (baffled flasks) de 250 ml e um bioreactor descontínuo de 2.5 l foram usados como modelos para o microreactor de perfusão. De modo a melhorar a produção de invertase, o efeito de diferentes compostos no meio de cultura, como fonte de carbono, fonte de nitrogénio (orgânico e inorgânico), iões metálicos, polietér, aminoácido e tampão na produção de invertase e no crescimento celular foram rastreados em escala laboratorial antes da redução de escala do processo. A actividade máxima de invertase num vaso com chicanas foi registada após 32 horas de processo (1.40 U/ml), imediatamente antes de atingir a fase estacionária, no meio optimizado não-tamponizado (20 g/l sacarose, 20 g/l extracto levedura e 7,5 g/l peptona bacteriológica) a 30 ⁰C, 200 rpm e um pH inicial de 6.0. Após microfabricação, o meio optimizado foi testado para factores de diluição 1, 10, 100 e 1000. A actividade máxima de invertase foi registada após perfusão do meio mais diluído por 54 horas (7.94 U/ml) em pH 6.0 e 30 ⁰C.
Microreactor, Invertase, Saccharomyces cerevisiae, Optimização

Junho 29, 2015, 11:30

Publicação

Obra sujeita a Direitos de Autor

Orientação

ORIENTADOR

João Pedro Estrela Rodrigues Conde

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Catedrático

ORIENTADOR

Pedro Carlos De Barros Fernandes

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Colaborador Não Remunerado Docente