Dissertação

Process strategy for food enzyme purification using Expanded Bed Absorption in laboratory and pilot scale EVALUATED

As operações iniciais de purificação de enzimas podem ser intensificadas com a utilização de cromatografia de leito expandido (EBA) que integra numa unica operação uma separação sólido-liquido e uma purificação. É assim espectável um aumento do rendimento total do processo e a redução do tempo de operação, custos de investimento e operacionais. Neste trabalho avaliou-se a aplicabilidade da EBA para purificar a enzima alvo directamente de um caldo fermentativo. O processo foi desenvolvido á escala laboratorial numa coluna de 2 cm de diâmetro interno, tendo-se aumentado a escala para uma coluna com 10 cm de diâmetro. A performance e hidrodinamica das colunas foi medida através de analises de tempos de residencia. Com o aumento dos ciclos de purificação observou-se uma variação da hidrodinamica da coluna, sendo necessário aumentar a velocidade superficial para obter a mesma expansão do leito. Por outro lado, as capacidades total, medida através de titulação dos ligandos, e capacidade dinâmica, medida através da saturação de enzima e de BSA, não sofrem alteração significativa. A capacidade dinâmica da resina foi em média 5249 unidades especificas/mL_resina (± 17%). O scale-up da operação foi realizado com sucesso, obtendo-se uma performance semelhante nas duas esclas testadas. Na coluna piloto purificaram-se 9,5 L de caldo fermentativo contendo enzima em cerca de 100 minutos.
adsorção em leito expandido, purificação de enzimas, cromatografia, hidrodinâmica, estratégia do processo

Novembro 21, 2014, 11:0

Publicação

Obra sujeita a Direitos de Autor

Orientação

ORIENTADOR

Duarte Miguel De França Teixeira dos Prazeres

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Associado

CO-ORIENTADOR

Gabriel Esteban Jaramillo Freydell

DSM

Doutor