Dissertação

Improvement of recombinant cellulase A production by Streptomyces lividans TK24: study on the effect of medium composition EVALUATED

A Streptomyces lividans tem sido utilizada com sucesso na produção heteróloga de várias enzimas. Um factor importante que afecta esta produção é a composição do meio. Dependendo do microorganismo e da biomolécula alvo, o meio óptimo pode mudar significativamente. Estudos anteriores provaram que os aminoácidos têm um papel importante no assunto. O objectivo deste estudo foi o aumento da produção da celulase A (celA) do termófilo Eubacterium Rhodothermus marinus utilizando a S. lividans TK24 recombinante como hospedeiro. Foram testados diferentes meios, de composição conhecida e complexos, adequados ao seu cultivo submerso em modo descontínuo usando bioreactores arejados. A celA foi quantificada e a composição do meio em aminoácidos e respectivo perfil de consumo foram determinados para diferentes pontos experimentais. Provou-se que nutrientes prontamente disponíveis, nomeadamente a glucose, aumentavam o crescimento celular, diminuíam o rendimento de celA e resultavam num excesso de ácidos orgânicos. Confirmou-se o uso de aspartato e glutamato na formação de biomassa. O meio que atingiu a maior concentração de celA foi o Duplo “Nutrient Broth” (2NB) rendendo 100mg/L. Ficou provado que o extracto de carne bovina foi o constituinte chave para esta maior produção. A análise de aminoácidos mostrou que uma concentração adequada de glutamina e triptofano no meio é provavelmente essencial para aumentar a produção. Os conhecimentos obtidos devem ajudar a desenvolver um ainda melhor meio de cultivo para a produção de celA. Uma celulase de qualidade e barata poderá diminuir significativamente o custo de produção do bioetanol tornando-o num combustível alternativo mais competitivo.
celulase A, Streptomyces lividans, produção heteróloga, composição do meio, utilização de aminoácidos, ácidos orgânicos

Novembro 14, 2016, 11:0

Publicação

Obra sujeita a Direitos de Autor

Orientação

ORIENTADOR

Kristel Bernaerts

Faculty of Engineering Science, KULeuven

Associate Professor

ORIENTADOR

Miguel Nobre Parreira Cacho Teixeira

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Auxiliar