Dissertação

Role of Tauroursodeoxycholic Acid during Expansion and Neural Commitment of Human Induced Pluripotent Stem Cells under Chemically-defined Conditions EVALUATED

As células estaminais neurais (NSC) vão-se incapacitando de, ao longo do tempo, gerar neurónios funcionais in vivo. Assim, recorrendo às células humanas pluripotentes induzidas (hiPSCs) como modelo, é possível estudar o processo de neurogénese e distúrbios associados. Estudos previamente reportados mostram que o ácido tauroursodesoxicólico (TUDCA) influenciou o aumento da proliferação e auto-renovação das NSC, actuando como neuroprotector, anti-apoptótico, e regulador do processo de diferenciação, comportamentos estes relacionados com a modelação da dinâmica da mitocôndria. Contudo, o efeito desta molécula na expansão, comprometimento neural e diferenciação das hiPSC nunca foi reportado, sendo assim o principal objectivo deste trabalho. Na expansão das hiPSCs, para o tratamento com 5 µM de TUDCA, obteve-se um maior número final de células comparativamente com o controlo. Por outro lado, para estudar o efeito do ácido biliar na geração de progenitores neurais (NPs) seguiu-se o protocolo de inibição dual-SMAD e contabilizou-se o número de rosetas neurais, tendo-se verificado um aumento de 76.6% para a concentração de 10 µM TUDCA. Investigou-se, assim, se este aumento de rosetas reportado estaria relacionado com o aumento da estabilidade da mitocôndria. Nos últimos dias de comprometimento neural, para o tratamento com TUDCA, verificou-se um aumento do ADN mitocondrial, dos níveis de ATP gerados, da estabilidade na geração de espécies reactivas de oxigénio e da estabilidade de proteínas envolvidas na dinâmica da mitocôndria. Assim, os resultados obtidos sugerem um efeito positivo do TUDCA aquando da expansão e do comprometimento neural das hiPSCs, estando potencialmente relacionado com a modelação da integridade mitocondrial.
Células humanas pluripotentes induzidas, Ácido tauroursodesoxicólico, Expansão, Comprometimento neural, Progenitores neurais, Mitocôndria

Setembro 23, 2016, 14:30

Publicação

Obra sujeita a Direitos de Autor

Orientação

ORIENTADOR

Susana Zeferino Solá Cruz

Faculdade de Farmácia, Universidade de Lisboa

Professor Auxiliar

ORIENTADOR

Tiago Paulo Gonçalves Fernandes

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Colaborador Não Remunerado Docente