Dissertação

Towards a high-throughput microfluidic drug discovery platform for the screening of GPCR targets in cells EVALUATED

Recetores acoplados à proteína G (GPCRs) constituem uma grande família de recetores da membrana que cumprem um papel importante em muitos processos celulares relacionados com doenças em humanos, e assim, são o principal alvo para 30-50% das moléculas farmacêuticas actualmente disponíveis, fármacos estes que facturam anualmente dezenas de biliões de dólares. Existem cerca de 1000 sequências de ADN identificadas como podendo ser GPCRs, com perto de 100 destas confirmadas como sendo recetores sem qualquer ligando conhecido, tendo assim um grande potencial para a descoberta de novos fármacos. Actualmente a descoberta de novos fármacos que têm como alvo GPCRs é feita através de tecnologias de elevada capacidade com a activação dos recetores monitorizada pelas diferenças de cálcio intracelular. Ensaios de cálcio com células vivas baseados na microfluídica podem ser feitos com baixo custo de material, usando volumes menores de soluções e proporcionar às células várias condições presentes no seu ambiente normal. Neste trabalho, um dispositivo microfluídico para a deteção de fármacos que têm como alvo GPCRs em células foi conceptualizado, em três módulos distintos. Um canal microfluídico com uma câmara onde ensaios de cálcio com células vivas são efectuados com o intuito de testar ligandos de GPCRs, um canal gerador de gradientes microfluídico com armadilhas celulares individuais para executar ensaios com concentrações diferentes simultaneamente e, a integração de fotodíodos de silicone amorfo hidrogenado com filtro de absorção incorporado num canal microfluídico capaz de detetar concentração de cálcio similares aquelas encontradas num ambiente intracelular antes e depois da ativação dos GPCRs.
Recetores Acoplados à Proteína G, microfluídica, fotodíodos, gerador de gradiente

Novembro 17, 2014, 9:0

Publicação

Obra sujeita a Direitos de Autor

Orientação

CO-ORIENTADOR

Duarte Miguel De França Teixeira dos Prazeres

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Associado

ORIENTADOR

João Pedro Estrela Rodrigues Conde

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Catedrático