Dissertação

Generation of liver specific endothelial cells for co-culture with hepatocytes EVALUATED

A importância dos hepatócitos para a Indústria farmacêutica e Medicina é irrenegável. A hepatite tóxica é a maior causa de remoção de medicamentos do mercado, salientando a necessidade de criar sistemas para o rastreio da toxicidade dos medicamentos. Além disso, as doenças hepáticas afectam 600 Milhões de pessoas e a falta de dadores para transplantes faz com que os hepatócitos sejam a melhor solução para o modelação de doenças e criação de novas terapias celulares. Numerosos esforços para a produção in vitro de hepatócitos a partir de células estaminais pluripotentes (PSCs) têm sido empregues, contudo todos os protocolos existentes originam células imaturas. Uma solução para este problema passa pela co-cultura de hepatócitos com outras células do fígado, dado que os sinais das células vizinhas são essenciais para a diferenciação. Neste trabalho tentou-se gerar um dos tipos de células hepáticas não-parenquimais, os sinusoides hepáticas (LSECs), para co-cultura com hepatócitos. LSECs são células endoteliais (ECs) com características específicas do fígado e por isso a sua diferenciação passa primeiro pela diferenciação de PSCs em ECs, e só depois em LSECs. Para a diferenciação de ECs, escolheu-se um protocolo de três passos, melhorado com a adição de várias citoquinas e factores de crescimento. Concluiu-se que elevadas concentrações de BMP4 juntamente com Activina A promovem a diferenciação da mesoderme e por conseguinte, do endotélio, e que a adição de Wnt3A e de SB-43152 também é beneficial. Para a diferenciação de ECs em LSECs, foi criado um sistema induzível contendo factores de transcrição de LSECs.
Células endoteliais, Células endoteliais sinusoides hepáticas, Co-cultura de hepatócitos, Engeharia do fígado,  Linha celular induzível, Sinusoides hepáticas.

Setembro 4, 2014, 12:0

Publicação

Obra sujeita a Direitos de Autor

Orientação

CO-ORIENTADOR

Ruben Boon

Stem Cell Institute of Leuven, KU Leuven

Engenheiro

ORIENTADOR

Maria Margarida Fonseca Rodrigues Diogo

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Auxiliar