Dissertação

Effects of varying mechanical cues on the vascular differentiation of induced pluripotent stem cells EVALUATED

A engenharia de tecidos é um campo com potencial para o tratamento de lesões causadas por doenças cardiovasculares. Um dos principais desafios é a criação de um sistema vascular para irrigar os tecidos obtidos, e fornecer-lhes os nutrientes e oxigénio necessários. Um método promissor é o uso de células estaminais pluripotentes, que têm a capacidade de se dividir indefinidamente e de se diferenciar em qualquer tipo de célula do corpo humano. Para aplicações terapêuticas, é necessário compreender a fundo o seu funcionamento e ter um controlo preciso da sua especificação em diferentes linhas celulares. Neste trabalho, exploramos a influência de sinais fisiológicos e químicos durante a fase de indução da mesoderme, nomeadamente a rigidez do substrato e a presença de soro animal, na diferenciação vascular de células estaminais pluripotentes induzidas numa população bicelular de células endoteliais e pericitos. Utiliza-se um esquema de diferenciação controlado, no qual as células são plaqueadas em poliestireno ou polidimetilsiloxano e diferenciadas durante 12 dias, com uma mudança de substrato e meio de cultura no dia 6. É seguida a expressão genética de OCT4, CTGF, KDR e T durante os primeiros seis dias, e no dia 12 as células são recolhidas para analisar a expressão de marcadores de células vasculares. Através de resultados RT-PCR e citometria de fluxo, demonstramos que em substratos menos rígidos e/ou em condições de ausência de soro animal, as células estaminais pluripotentes mostram uma mais eficente indução em mesoderme, o que leva à obtenção de uma população mais madura de células endoteliais.
engenharia de tecidos, pluripotência, rigidez, diferenciação, vascular

Junho 24, 2016, 14:30

Publicação

Obra sujeita a Direitos de Autor

Orientação

ORIENTADOR

Sharon Gerecht

The Johns Hopkins University

Principal Investigator

ORIENTADOR

Maria Margarida Fonseca Rodrigues Diogo

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Auxiliar