Dissertação

Size doesn't matter: The influence of cell diameter on lipid productivity of Chlorococcum littorale using fluorescence cell sorting EVALUATED

FACS (Fluorescence Activated Cell Sorting) é uma técnica utilizada com microalgas para isolar células com elevado conteúdo lipídico e criar novas populações com a mesma característica. No entanto, o efeito do diâmetro das células como critério de separação nunca foi estudado. Assim, o objectivo do presente trabalho foi avaliar o efeito do diâmetro das células na produtividade lipídica final das culturas. Foram desenvolvidas duas experiências: antes e depois da separação, com as mesmas condições experimentais, que incluem um período de stress por limitação de azoto. Para a separação foram criados quatro gates, de maneira a isolar diferentes diâmetros: pequeno (5-6 μm), médio (8-9 μm), grande (11-14 μm) e um de controlo (5-14 μm). O crescimento, a actividade fotossintética, a fluorescência da clorofila e dos lípidos e ainda o diâmetro foram seguidos diariamente, os três últimos através de fluid imaging. Simultaneamente foi desenvolvida a experiência Single-Cell, onde 15 amostras unicelulares de cada gate foram isoladas e após um período de recuperação analisados quanto à sua autofluorescência e diâmetro. As amostras dos quatro gates tiveram evoluções semelhantes no que diz respeito aos parâmetros seguidos. As diferenças na produtividade lipídica final entre os quatro tipos de amostras não foram estatisticamente significativas (P = 0.665 > 0.05), bem como no que toca ao diâmetro médio das células nas amostras da experiência Single-Cell (P = 0.628 > 0.05). Portanto, o diâmetro das células isoladas não tem influência na produtividade lipídica final das culturas.
Microalgas, C. littorale, FACS, Produtividade lipídica, Diâmetro.

Novembro 6, 2014, 16:0

Publicação

Obra sujeita a Direitos de Autor

Orientação

CO-ORIENTADOR

Dorinde Kleinegris

Wageningen University

Doutor

ORIENTADOR

Frederico Castelo Alves Ferreira

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Colaborador Não Remunerado Docente