Dissertação

Novel capture processes for monoclonal antibodies purification EVALUATED

Os anticorpos monoclonais (mAbs) são actualmente a classe de proteínas terapêuticas recombinantes com maior prevalência. Apesar da sua eficácia e segurança, o acesso generalizado a estes biofármacos encontra-se barrado pelos elevados preços de venda, principalmente devido aos custos de produção, tornando o desenvolvimento de processos mais económicos numa necessidade premente. Por outro lado, o processamento a jusante constitui agora o ponto de estrangulamento na produção de biofármacos, uma vez que a sua capacidade não acompanhou o recente aumento da produção a montante. Assim, é essencial desenhar processos inovadores para implementar nas actuais plataformas tecnológicas, bem como melhorar os já existentes. Para abordar a problemática recuperação de anticorpos monoclonais, duas resinas comerciais (o permutador catiónico heparina e a resina multimodal Capto™ MMC) foram avaliadas quanto à sua capacidade para capturar um anticorpo básico a partir de um sobrenadante de células CHO. Avaliou-se se as resinas conseguiam realizar uma adsorção independente de sal, carregando directamente nas colunas os sobrenadantes a moderada força iónica, mas apenas o meio multimodal revelou esta propriedade. Diferentes tampões de adsorção e eluição foram testados e, de um modo geral, o uso de valores de pH neutros a básicos conduziu ao melhor desempenho das resinas. Enquanto a heparina foi capaz de originar purezas (>80%) e rendimentos (>90%) bastante favoráveis para um primeiro passo de não-afinidade, a Capto™ MMC denotou a necessidade de optimização das condições operatórias. Apesar de ser necessário mais desenvolvimento, as resinas estudadas detêm o potencial para se tornarem em alternativas à cromatografia de Proteína A.
Anticorpos monoclonais, sobrenadantes de células CHO, processamento a jusante, cromatografia de permuta iónica, interacções multimodais

Dezembro 9, 2013, 11:30

Documentos da dissertação ainda não disponíveis publicamente

Orientação

CO-ORIENTADOR

Maria Raquel Murias dos Santos Aires Barros

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Catedrático

ORIENTADOR

Ana Margarida Nunes da Mata Pires de Azevedo

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Doutora