Dissertação

Differentiation of Adipose-derived Stem Cells into Endothelial Cells EVALUATED

Aterosclerose, doenças cardíacas e desordens relacionadas com a obesidade causam danos a nível endotelial. A incidência destas doenças tem aumentado, tornando necessário o desenvolvimento de enxertos vascularizados para um tratamento eficaz. Os enxertos podem ser constituídos por células endoteliais (ECs), pois estas encontram-se na camada interna dos vasos sanguíneos. Uma das fontes de ECs é as células estaminais do tecido adiposo humano (hASCs) que podem ser diferenciadas em ECs. Os objectivos deste estudo foram diferenciar eficientemente hASCs em ECs usando um meio de cultura optimizado, estudar o efeito do inibidor RepSox e dos factores de crescimento R3-IGF-1, hEGF, hidrocortisona e ácido ascórbico. Para caracterização celular aplicou-se citómetria de fluxo, avaliação da morfologia, imunofluorescência, sprouting, incorporação de lipoproteínas de baixa densidade e PCR em tempo real. Os resultados permitiram concluir que a variabilidade entre dadores tem um efeito mais forte que o efeito da diferença na composição dos meios M1, M2 e M3. Estes meios de diferenciação diferem na composição de factores de crescimento/pequenas moléculas e na origem do soro em relação ao meio comercialmente disponível EGM 2% FBS. Adicionalmente, M1, M2 e M3 apresentaram resultados semelhantes ou melhores que o EGM 2% FBS, indicando que RepSox, R3-IGF-1, hEGF, hidrocortisona e ácido ascórbico não são essenciais para promover a diferenciação. Por fim, com estes estudos espera-se perceber melhor a importância dos factores de crescimento/pequenas moléculas na diferenciação endotelial. Um meio de cultura optimizado aumentará a eficiência da diferenciação, fornecendo tratamentos mais eficazes a doentes que necessitam de enxertos vascularizados.
Células estaminais do tecido adiposo, Células endoteliais, Diferenciação, Optimização do meio de cultura.

Novembro 28, 2012, 17:0

Documentos da dissertação ainda não disponíveis publicamente

Orientação

CO-ORIENTADOR

André Poot

University of Twente

Doutor

ORIENTADOR

Cláudia Alexandra Martins Lobato da Silva

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Auxiliar