Dissertação

Generation of translational diseases in the Drosophila melanogaster model: - - EVALUATED

As sintetases aminoacil-tRNA (aaRSs) são enzimas essenciais para o processo de síntese proteica, sendo responsáveis pela adição do aminoácido correcto ao tRNA. Existem pelo menos vinte aaRSs (uma para cada aminoácido) e geralmente, os eucariotas possuem uma enzima aaRS funcional no citoplasma e outra em organelos com genoma próprio. Recentemente têm sido identificadas funções não-catalicas para estas enzimas. Mutações nas aaRSs podem causar danos irreparáveis no processo de tradução, originando doenças graves, por isso a investigação nesta área crucial para a produção de terapias adequadas. Neste projecto, as sintetases serina-tRNA (SRS) foram estudadas em Drosophila melanogaster. Com o objectivo de analisar os efeitos fenotípicos causados pelo processo de RNA de interferência das três putativas SRSs (m1-, m2- and c-SRS) construiram-se moscas RNAi trangenicas com o fim de silenciar cada SRS, através da ferramenta UAS/GAL4. Verificou-se que um knock down constitutivo e ubíquo do mRNA da correspondente SRS causou letalidade absoluta. Bloqueamos ainda a tradução de cada SRS apenas em certos tecidos. No tecido de asa, com o uso dos drivers nub-GAL4 e MS1096-GAL4, a indução de RNAi deu origem a aberrações morfológicas nas asas, para as três SRS. A indução de RNAi no tecido de olho também causou danos, em moscas com um mês de idade. Estes resultados provam a existência de funções essenciais para m1-, m2- e c-SRS. O processo RNAi aqui usado permite a obtenção de moscas cujo sistema de tradução pode ser bloqueado de uma maneira controlada e o estudo dos efeitos causados por esta acção
vSintetases aminoacil-tRNA, sintetases serina-tRNA, RNAi, Drosophila melanogaster, doenças

Novembro 17, 2008, 14:0

Publicação

Obra sujeita a Direitos de Autor

Orientação

CO-ORIENTADOR

Lluis Ribas de Pouplana

IRB-  Intituto de Ivestigación Biomédica

Especialista

ORIENTADOR

Álvaro Augusto Marques Tavares

Departamento de Engenharia Química e Biológica (DEQB)

Professor Auxiliar