Dissertação

Involvement of the cAMP pathway in apoptosis in a Saccharomyces cerevisiae glucose-negative mutant EVALUATED

A levedura Saccharomyces cerevisiae responde à presença de glucose ampliando a sua taxa de crescimento através do aumento da fermentação. A eliminação de um gene envolvido no metabolismo da trealose causa um defeito específico no crescimento em meios contendo glucose, com uma hiperacumulação dos metabolitos da primeira parte da glicólise, especialmente frutose-1,6-bifosfato, e um rápida depleção do ATP. Os nossos resultados mostram que este processo é acompanhado de um fenótipo apoptótico. Acumulação de ROS, exposição de fosfatidilserina e libertação de citocromo c da mitocôndria são observados após a adição de glucose, sugerindo o envolvimento deste organelo no processo. A eliminação dos genes RAS2 ou GPA2 e a sobreexpressão de PDE2, envolvidos na sinalização de glucose através da via do cAMP, restauram o crescimento deste mutante em glucose, provavelmente através da diminuição dos níveis de cAMP. No entanto, imediatamente após a adição de glucose, todas as estirpes exibem a mesma incapacidade para crescer em meio com glucose, os mesmos perfis de acumulação dos metabolitos, ausência de ATP, elevados níveis de ROS e libertação de citocromo c. Apesar destas características iniciais, após um período de adaptação os mutantes começam a crescer e recuperam da desregulação da glicólise, restaurando as concentrações de metabolitos e ATP ao nível da estirpe selvagem. Os efeitos da sobreexpressão de PDE2 são mais pronunciados do que a eliminação de RAS2 ou GPA2, indicando que altos níveis de cAMP, e esta via, estão directamente envolvidos no processo apoptótico e na ausência de crescimento deste mutante em glucose.
levedura, sinalização de glucose, via do cAMP, apoptose dependente de mitocôndria

Outubro 31, 2008, 9:30

Documentos da dissertação ainda não disponíveis publicamente

Orientação

CO-ORIENTADOR

Johan Thevelein

Department Biologie, Lab. Voor Moleculaire Celbiologie, KULeuven, Belgica

Especialista

ORIENTADOR

Isabel Maria De Sá Correia Leite de Almeida

Departamento de Engenharia Química e Biológica (DEQB)

Professor Catedrático