Dissertação

Estudo do mecanismo de importação nuclear do antigénio do vírus da hepatite delta EVALUATED

O vírus da hepatite delta (HDV) é o agente patogénico responsável por uma das formas mais severas de hepatite viral. O genoma do HDV consiste numa molécula de RNA circular de cadeia simples que apresenta apenas uma grelha de leitura aberta, codificante para o antigénio delta (HDAg). O antigénio delta apresenta um sinal de localização nuclear (NLS) essencial para importação nuclear das ribonucleoproteínas do HDV. Neste trabalho procurou-se caracterizar melhor a sequência 66EGAPPAKRAR75 como NLS do HDAg e identificar as proteínas que com ele interagem. Relativamente à especificidade do NLS do HDAg para funcionar apenas em células hepáticas, verificou-se que o sinal não é específico pois foi capaz de promover a importação nuclear de uma proteína repórter em fibroblastos de murganho. O estudo do NLS no contexto da proteína nativa confirmou que a sequência é essencial para a importação nuclear do HDAg e a necessidade do amino ácido 66 para a funcionalidade do mesmo. Para a identificação das proteínas da célula hospedeira que interagem com o NLS realizaram-se ensaios de cromatografia de afinidade seguidos da identificação das proteínas de interesse por espectrometria de massa. Identificaram-se apenas duas proteínas com possível interesse, a vimentina, que possui um NLS funcional e a zinc finger protein, uma proteína nuclear. Estes resultados colocaram a hipótese de o HDAg ser importado para o núcleo das células indirectamente por interacção com proteínas da célula hospedeira que são transportadas para o núcleo.
Vírus da Hepatite Delta, antigénio delta, sinal de localização nuclear, importação nuclear

Novembro 7, 2007, 9:30

Documentos da dissertação ainda não disponíveis publicamente

Orientação

CO-ORIENTADOR

CELSO VLADIMIRO CUNHA

INSTITUTO DE HOGIENE E MEDICINA TROPICAL

Especialista

ORIENTADOR

Álvaro Augusto Marques Tavares

Departamento de Engenharia Química e Biológica (DEQB)

Professor Auxiliar