Dissertação
Deciphering the identity of oral and gut bacteria in colorectal cancer EVALUATED
O cancro do colo-retal (CRC) é consistentemente o terceiro cancro mais mortífero em todo o mundo. Estudos recentes estabeleceram que uma comunidade alterada de bactérias (microbiota disbiótico) é uma característica do CRC e questionaram se parte destas bactérias serão derivadas da cavidade oral. Neste trabalho, recrutaram-se pacientes com CRC, e desenvolveu-se uma abordagem alargada, incluindo técnicas de histologia e imunologia; análise metagenómica do microbiota; e uma metodologia completa de cultura e identificação de microrganismos, testando múltiplas condições, que permitiu isolar bactérias fecais, orais e de tumor destes pacientes. A colonização de tumores por bactérias orais foi investigada através do cultivo e isolamento de bactérias provenientes desses tumores e esfregaços orais de 2 pacientes com CRC. Seguiu-se a identificação das espécies por sequenciação automática de Sanger (amplificação da sequência inteira do gene 16S rRNA) e por obtenção dos perfis de RAPD (random amplified polymorphic DNA) de forma a comparar a estrutura genómica dos isolados orais e tumorais da mesma espécie. A colonização dos tumores por bactérias orais foi observada em 15 espécies pertencentes a 6 famílias diferentes e a 2 filos. Esta identificação é o primeiro passo, seguindo-se futuramente estudos sobre a sua capacidade para provocar inflamação, produção de citoquinas e proliferação celular. Este projeto permitiu criar uma coleção filogenética definida contendo 500 culturas puras pertencentes a 95 espécies diferentes (contendo 10 estirpes consideradas não cultiváveis até ao momento), 28 famílias e 5 filos, e que poderá contribuir para melhor compreender os mecanismos desta doença.
novembro 26, 2018, 14:0
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