Dissertação

Investigation into acetylation as a post translation modification that regulates Cyclophilin A function in human tumour cells EVALUATED

O objetivo deste projeto é o estudo da acetilação como regulador da função da ciclofilina A em células cancerígenas. A Ciclofilina A é um membro da família das Ciclofilinas, uma família de proteínas com atividade de peptidil-prolil isomerase. Esta proteína encontra-se sobre expressa em vários tipos de cancro apesar da sua função específica em células cancerígenas ainda não ter sido descrita. Trabalhos recentes demonstraram o seu envolvimento na divisão de células de leucemia e de linfoma, relocalizando-se dos centrossomas para o midbody, tendo neste um papel fundamental na citocinese. Os mecanismos que estão por detrás desta movimentação ainda não são conhecidos, contudo pensa-se que uma modificação pós traducional possa ser o indutor. Para testar esta hipótese uma primeira abordagem de optimização das condições de detecção da forma modificada da proteína foi tomada. Para isso as células foram sincronizadas nas várias fases do ciclo celular. Concluiu-se que esta proteína sofre uma modificação pós traducional dependente do ciclo celular. O enriquecimento da população em células mitóticas foi demonstrada como a melhor condição para aumentar a percentagem de proteína modificada. De forma a confirmar que esta modificação era devido a uma acetilação da Ciclofilina A, várias estratégias foram adoptadas incluindo espectroscopia de massa e técnicas de immunoprecipitação de proteína endógena e exógena conjugadas com análise por Western blotting. A ciclofilina A foi identificada em immunoprecipitados de proteínas acetiladas extraídas de extratos celulares de células cancerígenas, sugerindo que é de facto acetilada.
Ciclofilina A, peptidil-prolil isomerase, modificação pós traducional, acetilação, leucemia, células cancerígenas

Novembro 16, 2017, 10:0

Publicação

Obra sujeita a Direitos de Autor

Orientação

ORIENTADOR

Margaret McGee

Conway Institute of Biomedical and Biochemical – University College Dublin

Assistant Professor

ORIENTADOR

Nuno Gonçalo Pereira Mira

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Auxiliar