Dissertação

Hybrid nano-biocomposites for skin care applications EVALUATED

Esta tese procura servir de base para o desenvolvimento de novos e alternativos materiais antibacterianos de forma a combater o desenvolvimento de resistência, nomeadamente, a antibióticos, por parte das bactérias causadoras de infecções na pele. Para isso está dividida em duas secções. Primeiramente, o revestimento da superficie de nanoparticulas (NP) de Gantrez comercial através da técnica de “layer-by-layer” (LbL) com adição successiva de polielectrólitos de cargas opostas, especificamente, a aminocelulose e o ácido hialurónico. A aminocelulose, para além de ter propriedades antibacterianas, possui grupos funcionais que permitirão a ligação de moléculas de “quorum sensing”, que permitirão “cell targetting”. Em segundo, a optimização do protocolo de produção e purificação de uma enzima de “quorum quenching”, a lactonase, que futuramente será incorporada nas partículas LbL, melhorando o efeito antibacteriano. Para produzir as NPs LBL, as particulas de Gantrez foram diluidas separadamente até 1.98x1012NP/ml, 9.9x1011NP/ml e 4.95x1011 NP/ml, e, após cada deposição de polielectrólito, a purificação das mesmas foi feita através de ultracentrifugação, obtendo-se partículas com 5 camadas e tamanhos médios, medidos através de NTA, de 401nm, 302nm e 369nm, respectivamente, e 665nm, 717nm e 726nm, respectivamente, através de DLS. Os valores de PDI finais foram 0.424, 0.864 e 0.771, respectivamente, obtendo-se também, rendimentos de purificação de 1.14%, 1.21% e 0.624%, respectivamente. Quanto à produção e purificação de lactonase, a proteína foi produzida com sucesso, e foi possível aferir, através de coloração com Coomassie e Western Blot, que a proteína elui a concentrações de imidazole em tampão HNa2PO4/H2NaPO4 maiores ou iguais a 250mM.
Antibacteriano, Nanopartículas, Polielectrólitos, Layer-by-Layer; Lactonase.

Novembro 9, 2016, 14:30

Publicação

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Orientação

ORIENTADOR

Frederico Castelo Alves Ferreira

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Auxiliar

ORIENTADOR

Tzanko Tzanov

UPC (Universitat Politècnica de Catalunya)

Professor