Dissertação

Biopharmaceutical Stability Evaluation - Can a Universal Pathway Be Defined? EVALUATED

O mercado dos biofarmacêuticos, especialmente os produtos baseados em proteínas, é a classe de terapêuticos com maior crescimento. Contudo, a estrutura complexa das biomoléculas, torna estes produtos susceptíveis a degradação, tornando-se essencial estudar a sua estabilidade. Neste trabalho desenvolveu-se metodologias analíticas, para o estudo da estabilidade coloidal e conformacional de proteínas e estudos de degradação forçada (FDS) de modo a obter informação sobre a estabilidade intrínseca das proteínas e os principais produtos de degradação. As técnicas de dispersão dinâmica da luz, fluorimetria de varrimento diferencial e cromatografia de exclusão molecular foram aplicadas. A lisozima e o IgG foram as proteínas modelo escolhidas e o efeito de um excipiente na sua estabilidade, arginina e trealose, respetivamente, foram avaliados. A arginina apresenta um efeito estabilizante na estabilidade coloidal da lisozima e não altera a estabilidade conformacional. Contudo, este excipinte promove a agregação da lisozima a temperaturas mais baixas. No caso do IgG, a trealose tem um efeito positivo na estabilidade coloidal. No entanto, este efeito é dependente da concentração. A trealose não apresenta nenhum efeito significativo no processo de desnaturação, mas previne o processo de agregação do IgG. Estes resultados sugerem que a trehalose pode ser um excipiente adequado para estudos de formulação com IgG. Nos FDS os fatores de stress oxidativo, redutivo e térmico foram aplicados. Estes fatores induziram principalmente a fragmentação e a precipitação da proteína e um aumento na fração insolúvel especialmente no stress redutivo, em ambas as proteínas. Elevadas concentrações de trealose promovem uma precipitação significativa de IgG.
Biofarmacêuticos, caracterização biofísica, estudos de degradação forçada, estabilidade coloidal, estabilidade conformacional.

janeiro 19, 2021, 10:0

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Orientação

ORIENTADOR

Joana Margarida Lopes da Silva Cristóvão

Hovione Farmaciência S.A.

Doutora

ORIENTADOR

Ana Margarida Nunes da Mata Pires de Azevedo

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Auxiliar