Dissertação

Genetic determinants of cell aggregation in Burkholderia multivorans EVALUATED

A Fibrose quística é a doença genética mais comum e letal. A mortalidade elevada resulta tipicamente da insuficiência respiratória causada por infecções bacterianas nos pulmões. Pseudomonas aeruginosa e Burkholderia são os agentes patogénicos mais prevalentes nos pulmões de pacientes com fibrose quística. A formação de biofilmes é clinicamente relevante uma vez que ajuda as bactérias a resistir mais eficientemente à acção de antibióticos, conferindo-lhes ao mesmo tempo uma maior protecção contra a resposta imunitária do hospedeiro. Estudos recentes demonstram que, em infecções pulmonares as bactérias normalmente formam agregados com outras bactérias através de componentes da própria matriz e de muco. Assim, as infecções crónicas caracterizam-se pela presença de agregados suspensos nos tecidos ou lúmen. Os mecanismos envolvidos na formação de agregados por parte da espécie Burkholderia ainda não são claros, por esse motivo neste trabalho pretendia-se investigar os determinantes genéticos da agregação celular por parte da Burkholderia multivorans. Para este propósito, construiu-se uma biblioteca de mutantes de inserção a partir de um isolado clínico, e seleccionaram-se seis mutantes com capacidade de agregação reduzida. Caracterizou-se cada um dos mutantes em termos de fenótipos como mobilidade, produção de exopolissacáridos, susceptibilidade a antibióticos e taxa de crescimento. Após confirmação da inserção do plasposão, três regiões flanqueantes foram sequenciadas com sucesso. Dos genes interrompidos, um codifica a fosfoenolpiruvato sintase, outro faz parte de um sistema de secreção tipo VI, enquanto o último está envolvido num sistema regulador de dois componentes.
Agregados Celulares, Biofilmes, Fibrose Quística, Burkholderia multivorans, Biblioteca de mutantes

junho 18, 2019, 9:30

Publicação

Obra sujeita a Direitos de Autor

Orientação

ORIENTADOR

Leonilde de Fátima Morais Moreira

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Auxiliar