Dissertação

Development of an electroporation lysis biochip EVALUATED

A lise celular para extração de produtos intracelulares é crucial nos bioprocessos pois é o primeiro procedimento do pré-tratamento celular que irá influenciar a análise destes produtos. Os biochips microfluídicos são sistemas promissores para a operação destes processos. Este projeto visa o desenvolvimento de um chip de eletroporação para lise celular, uma vez que a lise elétrica é um método eficiente e permite a seletividade de membranas. Foram desenvolvidos dois biochips para lisar células de Escherichia coli (E. coli) e Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), usando corrente alternada para evitar a formação de bolhas na superfície dos elétrodos. Foi desenvolvido um dispositivo microfluídico com elétrodos líquidos, nomeadamente gálio/índio eutéctico. Este é um método novo e promissor, com um processo de microfabricação não complexo. Uma segunda abordagem foi implementada, na qual elétrodos planares interdigitados foram usados, e testados com e sem uma camada de passivação. Validou-se as forças do campo elétrico necessárias para lisar as células em questão através de electroporação à macroescala. Obteve-se 32.90 % de lise celular com 1884 V para S. cerevisiae e 24.45 % com 2500 V para E. coli. Através do estudo de sistemas de duas fases aquosas, diferentes curvas binodais foram obtidas para sistemas compostos de Polyethylene glycol (PEG) 3350 e tampão fosfato, com o objetivo de estudar a influência dos diferentes componentes da solução de lizado na formação das fases. O particionamento de células foi conseguido para a fase rica em sal.
Lise elétrica, Elétrodos líquidos, Elétrodos planares, Lise celular de E. coli, Lise celular de S. cerevisiae, Microfluídica

Novembro 14, 2018, 10:0

Documentos da dissertação ainda não disponíveis publicamente

Orientação

ORIENTADOR

João Pedro Estrela Rodrigues Conde

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Catedrático

ORIENTADOR

Maria Raquel Murias dos Santos Aires Barros

Departamento de Bioengenharia (DBE)

Professor Catedrático