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Dissertação

Optimization of a microfluidic assay for the detection of free prostate specific antigen EVALUATED

Detalhes: O elevado número de falsos positivos em testes de cancro da próstata (PCa) têm demonstrado a necessidade de criar um ensaio multiplex capaz de cruzar informação de vários biomarcadores do cancro da próstata, ao ponto de fornecer um diagnóstico mais fidedígno. Um ELISA miniaturizado foi otimizado a fim de detectar concentrações clinicamente relevantes (1-4 ng mL-1) de free prostate specific antigen (f-PSA). Um dispositivo microfluidico composto de microcanais foi microfabricado com dimetil polisiloxano (PDMS), por meio de litografia e selado a uma lâmina de vidro. Os parâmetros do ELISA, como a concentração de moléculas, o tempo de incubação, taxa de fluxo e metodologia de bloqueio foram optimizados. Foram detetadas concentrações na ordem do ng mL-1 com os métodos de fluorescência, quimioluminescência e colorimetria. Parâmetros de imagem do microscópio para todos os três métodos de detecção foram otimizados. Deteção da colorimetria também foi efectuada em fotodíodos de silício amorfo hidrogenado (a-Si: H) p-i-n. As curvas de calibração foram construidas com base na deteção de soluções com f-PSA. Os limites de detecção foram calculados para todos as três metodologias de deteção.
Keywords: ELISA, microfluídica, cancro da próstata, PSA, Biomarcadores, Fotodíodos

Discussão: novembro 24, 2014, 9:30