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Dissertação

New players controlling multidrug resistance and biofilm formation in Candida glabrata: the important role of Rpn4 EVALUATED

Detalhes: Candida glabrata tem vindo a emergir como uma das principais causas de infeções fúngicas nosocomiais, apresentando reduzida suscetibilidade a antifúngicos e uma capacidade incomum de conseguir proliferar dentro do hospedeiro humano. Pouco se sabe acerca dos seus mecanismos de regulação transcricional da resistência a fármacos e da formação de biofilme. Neste estudo, foi realizada uma análise fenotípica a dezassete genes não caracterizados de C. glabrata no âmbito de identificar novos intervenientes nestes dois processos importantes para a virulência. A seleção dos genes foi efetuada com base na similaridade de aminoácidos com fatores de transcrição conhecidos de S. cerevisiae ou C. albicans. Os ensaios de suscetibilidade a antifúngicos e a quantificação de biofilme revelaram o envolvimento do gene CgRPN4 nos mecanismos de resistência a azóis e formação de biofilme. Verificou-se que CgRpn4p apresenta localização nuclear tanto em células em condições controlo bem como expostas a fluconazole ou ketoconazole. O efeito da deleção do gene CgRPN4 no transcriptoma de C. glabrata em resposta ao fluconazole também foi avaliado, através de RNA-seq. Os dados mostraram que este TF está envolvido na ativação de genes associados a diferentes grupos funcionais, como metabolismo de aminoácidos, e na repressão, provavelmente indireta, de outros, por exemplo envolvidos na biogénese do ribossoma e tradução. Este conjunto de genes são candidatos promissores no contexto do mecanismo de resistência azóis. A análise das regiões promotoras dos genes ativados pelo CgRpn4 permitiu a identificação de duas possíveis partes de locais de ligação para este fator de transcrição: GAAGCA e AGTCTA.
Keywords: Candida glabrata, resistência a antifúngicos, formação de biofilme, CgRPN4, RNA-seq.

Discussão: novembro 23, 2017, 15:0