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Dissertação

Genetic Transformation of Neochloris oleoabundans and Acutodesmus obliquus using bacterial conjugation EVALUATED

Detalhes: As microalgas são organismos fotossintéticos com uma vasta game de aplicações industriais, desde a produção de alimentos e ingredientes alimentares como lípidos e proteínas, a síntese de biocombustíveis, e produção de anticorpos. O desenvolvimento de estirpes tem sido severamente prejudicado pela ausência de técnicas de transformação optimizadas para microalgas. Um dos novos métodos para o fazer é por conjugação, um processo pelo qual uma célula doadora transfere DNA para uma célula receptora. É conhecida por ocorrer abundantemente entre bactérias, e foi recentemente implementada na transformação de diatomáceas. Neste ensaio as microalgas verdes Acutodesmus obliquus e Neochloris oleoabundans foram transformadas com sucesso usando Escherichia coli como doador, com o plasmídeo epissomal pPtPuc3, enquanto que com o plasmídeo epissomal pTpPuc3 ainda necessita de ser confirmada. Foram desenvolvidos protocolos para a transformação genética de microalgas, ainda que careçam de optimização. Foi encontrada uma correlação entre o prolongamento do tempo de conjugação e um maior número de colónias, para tanto A. obliquus e N. oleoabundans. Para A. obliquus, o tempo de conjugação de 60 minutos demonstrou um melhor rácio entre colónias transformantes e as presentes nos controlos, enquanto que para 90 minutos e 120 minutos de conjugação verificou-se apenas uma pequena margem entre o número de colónias possivelmente transformantes e as colónias presentes nos controlos. Para N. oleoabundans, não foi encontrada qualquer relação entre períodos de incubação mais curtos e relação transformantes não confirmados/controlo vantagosa. Adicionalmente, foi visto que o número de cólonias foi aumentado ao prolongar a exposição das culturas a luz.
Keywords: Neochloris oleoabundans, Acutodesmus obliquus, microalgae verdes, Conjugação, Transformação Genética

Discussão: outubro 28, 2016, 11:0