FenixEdu™

Dissertação

Immunodetection in paper-based devices using Carbohydrate Binding Modules fusions for antibody anchoring and gold nanoparticles for colorimetric reporting EVALUATED

Detalhes: Existe uma demanda global de plataformas analíticas acessíveis, sensíveis, selectivas e rápidas para diagnóstico de saúde, analíse ambiental ou testes de qualidade dos alimentos. Os dispositivos analíticos baseados em papel (PADs) surgiram como uma destas plataformas, com as vantagens adicionais de serem biodegradáveis, fáceis de usar e portáteis. O papel pode ser modificado e adaptado para realizar ensaios biológicos adicionando um elemento de reconhecimento biomolecular adequado e um agente reporter para as áreas de teste, mas um problema subjacente é a orientação das biomoléculas na matriz de papel. Isto pode ser resolvido através da fusão dos elementos de reconhecimento biomolecular com domínios de proteínas como por exemplo, módulos de ligação a carbohidratos (CBMs), que têm uma elevada afinidade para a celulose. Um exemplo é CBM3-ZZ, uma proteína que combina as propriedades de ligação à celulose de CBM3a de C. thermocellum, com as propriedades de ligação de anticorpos de um duplo domínio-Z da proteína A. Impressão de cera foi utilizado para delinear áreas circulares de reacção (spots) e microcanais em papel. Em seguida, anticorpos antibiotina foram imobilizados no papel através da fusão CBM3-ZZ e a sua capacidade para reconhecer a biotina foi testada utilizando nanopartículas de ouro revestidas com biotina (biotina-AuNPs). A captura de biotina-AuNPs pelo complexo CBM3-ZZ: antibiotina tanto em spots como em microcanais pode ser detectada visualmente através da geração de uma cor vermelha que é praticamente ausente nos controlos. Estes resultados abrem a possibilidade de combinar CBMs e nanopartículas de ouro com PADs para fins de imunodetecção.
Keywords: Imunoensaios, Dispositivos analíticos baseados em papel, Módulos de ligação a carboidratos, Domínios-ZZ, Nanopartículas de ouro.

Discussão: dezembro 4, 2015, 17:0