Dissertação
Integrated Extraction, Concentration and Quantification of Ochratoxin A in Wines using a Microfluidic Aqueous Two Phase Extraction coupled to a Fluorescence Linked Immunosorbent Assay EVALUATED
A Ocratoxina A (OTA) é um metabolito secundário produzido maioritariamente por fungos do género Aspergillus e Penicillium. Estes fungos são contaminantes de uma grande variedade de produtos agrículas, de entre os quais estão incluídas as uvas. Tal situação é um potencial problema de saúde pública, já que efeitos hepatotóxicos, nefrotóxicos, neurotóxicos, teratogénicos, imunotóxicos e carcinogénicos foram observados em animais de laboratório devido ao consumo de OTA. Dados os potenciais efeitos nefastos, foi estabelecido um limite máximo de 2ng/mL para a presença de OTA em produtos vinícolas. No entanto, de modo a forçar o cumprimento deste limite seria desejável um método que permitisse monitorizar os níveis de OTA no terreno e, se necessário, enviar a amostra para quantificação num laboratório certificado. De forma a abordar este problema, um dispositivo microfluído integrado composto por dois módulos foi desenvolvido. O primeiro modulo tem funções de extracção e concentração da amostra, recorrendo a uma extracção por duas fases aquousa, enquanto no segundo é efectuado um imunoensaio. Usando esta estratégia, foi obtido um limite de detecção (LoD) de 0,26ng/mL para a OTA em vinho tinto. Tal desenvolvimento destaca uma nova aplicação para sistemas de duas fases aquosas, direccionada ao aumento da sensibilidade de imunoensaios. Em comparação directa, enquanto que o LoD da OTA em tampão PBS numa ELISA em microplaca foi de 0,93ng/mL, em vinho tinto atingiu os 0,25ng/mL. Assim sendo, estas descobertas podem potenciar o desenvolvimento de uma plataforma simples e de baixo custo para extracção e concentração de biomoléculas, à macro e micro-escala.
novembro 12, 2013, 14:0
Documentos da dissertação ainda não disponíveis publicamente
Orientação
CO-ORIENTADOR
João Pedro Estrela Rodrigues Conde
Departamento de Bioengenharia (DBE)
Professor Catedrático
ORIENTADOR
Maria Raquel Murias dos Santos Aires Barros
Departamento de Bioengenharia (DBE)
Professor Catedrático