FenixEdu™

Dissertação

LYTAG-driven Integrative Platform for Purification of Monoclonal Antibodies by Aqueous Two-phase Systems EVALUATED

Detalhes: Nos últimos anos, a indústria dos anticorpos monoclonais tem tido um crescimento constante, tornando-se num dos sectores mais importantes da Indústria Biotecnológica e Farmacêutica. Apesar do processamento a jusante, i.e. os processos responsáveis pela produção de anticorpos, terem vindo a sofrer um grande avanço científico e tecnológico, é nos processos a montante, os dedicados à purificação, que existem as maiores limitações, nomeadamente no que respeita aos custos económicos, podendo chegar aos 50 ou 80% dos custos totais do processo. Os sistemas de duas fases aquosas (ATPS) têm sido descritos como uma alternativa viável ao processo atual de purificação, uma vez que é possível clarificar, concentrar e purificar os anticorpos num único passo. Nesta tese, efetuaram-se estudos de purificação de anticorpos usando-se sistemas compostos por PEG/fosfato, PEG/dextrano e PEG/acrilato. Um novo sistema de afinidade foi empregue, baseando-se na dupla afinidade proporcionada pela molécula LYTAG-Proteína A para com o PEG e o anticorpo. Concluiu-se que os sistemas polímero/polímero são os mais adequados uma vez que elevadas concentrações de fosfato interferem com esta interação. Também foi possível, proceder à integração de processos, a qual tinha como objetivo a remoção das células produtoras de anticorpos (CHO) bem como a purificação destes num só passo de extração. O sistema composto por 8% PEG 4000, 6% acrilato 8000, 10% LYTAG-Proteína A e 550mM NaCl a pH 7, foi considerado o melhor sistema para remover as células da fase de cima eficazmente, bem como para purificar anticorpos com um rendimento de 99%.
Keywords: anticorpos monoclonais, sistemas de duas fases aquosas (ATPS), purificação, afinidade, LYTAG-Proteína A, integração.

Discussão: novembro 12, 2013, 15:30

Documentos da dissertação ainda não disponíveis publicamente