Dissertação
Expansion of Human Neural Stem Cells derived from Pluripotent Stem Cells under Xeno-free conditions EVALUATED
As células estaminais neurais apresentam potencialmente diversas aplicações biomédicas, como a reposição de células para o tratamento de doenças neurodegenerativas e para estudar os mecanismos subjacentes à neurogénese. A maioria das aplicações destas células requer um elevado número de células. O trabalho experimental realizado no contexto desta tese foca-se na expansão de células estaminais neurais humanas semelhantes a células do neuroepitélio, derivadas a partir de células estaminais embrionárias e de células estaminais pluripotentes induzidas, em diferentes condições de cultura aderente, com o objectivo de estabelecer um sistema de cultura dinâmico em larga escala usando micropartículas para adesão das células. O crescimento celular foi avaliado para diferentes tensões de oxigénio, onde as células foram expostas a percentagens de oxigénio de 2% e 20%, mostrando resultados semelhantes nos diferentes ensaios, e para diferentes regimes de suplementação do meio com factores de crescimento. Foram testados vários substratos de adesão celular para a identificação do substrato mais apropriado para uma adesão e proliferação óptimas das células, mantendo a multipotência e potencial de diferenciação, propriedades avaliadas através de técnicas de imunocitoquimica. Foram testados a Laminina, Pronectina F, Pronectina F Plus e CELLstart™. O CELLstart™, como substrato xeno-free com melhores resultados em sistema estático, e a Pronectina F, como segundo melhor, foram os substratos escolhidos a serem usados como revestimento das micropartículas de Plastic e Plastic Plus, em que na sua superfície as células aderiram e proliferaram, num spinner flask. O crescimento celular foi melhor quando as células cresceram aderentes às micropartículas revestidas por Pronectina F.
julho 26, 2012, 10:0
Documentos da dissertação ainda não disponíveis publicamente
Orientação
CO-ORIENTADOR
Departamento de Bioengenharia (DBE)
Professor Catedrático
