Dissertação
Functional analysis of the Burkholderia cepacia complex bceOSU genes encoding putative polysaccharide O-acyltransferases EVALUATED
O complexo Burkholderia cepacia (Bcc) reúne bactérias Gram-negativas que têm atraído um interesse considerável devido a infecções em pacientes com fibrose quística. Têm-se realizado estudos para entender a sua patogenicidade e vários factores de virulência foram identificados. Um desses factores é o exopolissacarídeo cepaciano produzido pela maioria das estipes de Bcc. Estruturalmente, o cepaciano é composto por uma unidade repetitiva de um heptassacarídeo acetilado. Os genes envolvidos na biossíntese de cepaciano são conhecidos e alguns dos seus produtos estão caracterizados. Embora as aciltransferases codificadas pelos genes bceO (BCAM1005), bceS (BCAM1009) e bceU (BCAM1011) hipoteticamente envolvidas na acetilação do cepaciano sejam conhecidas, estas ainda não foram caracterizadas e pouco se sabe sobre o seu papel na acetilação e na patogenicidade destas bactérias. Neste estudo, delineou-se uma estratégia para a obtenção de mutantes de eliminação não marcados em cada um dos genes bceO, bceS e bceU de Burkholderia. Embora algumas construções genéticas tenham sido obtidas, incluindo os plasmídeos para experiências de complementação, nenhuma das estratégias chegou ao fim. Em vez disso, usou-se o mutante de inserção B. multivorans ATCC 17616::bceS já existente. Os resultados obtidos confirmaram que a falta da proteína BceS não afectou a quantidade de exopolissacárido produzido por B. multivorans, mas observou-se uma redução de 60% do teor de grupos O-acetilo. Além disso, a O-acetilação do cepaciano parece ter um papel quer na formação de biofilme quer na virulência em Galleria mellonella. Estudos adicionais terão de ser efectuados para entender o papel fisiológico da acetilação do cepaciano em Bcc.
novembro 26, 2012, 11:0
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Orientação
