Dissertação
Isolation, Characterization and Ex-vivo Expansion of Mesenchymal Stem Cells from Umbilical Cord Matrix EVALUATED
O presente trabalho teve como objectivo o isolamento e expansão de células estaminais mesenquimais (hMSCs) da matriz do cordão umbilical (UCM) e caracterização comparativa com hMSCs provenientes de outras fontes: medula óssea (BM) e tecido adiposo (AT). A taxa de sucesso de isolamento atingiu 80% conduzindo ao isolamento de 1.9x105 (± 0.21x105) hMSCs na passagem inicial. O tempo médio de isolamento foi 14 dias (±7). As células isoladas apresentaram o imunofenótipo descrito pelo International Society of Cellular Therapy. Os isolamentos foram realizados em meios de cultura com soro animal (DMEM + 10% FBS) e meios sem soro (StemPROTM) e sem factores de origem xenogénica (StemPRO XFTM). O spinner flask revelou-se mais eficiente do que o sistema estático atingindo maior número de células num menor tempo de cultura e sem recorrer a consecutivas passagens celulares. Quando comparadas com outras fontes, as UCM-hMSCs apresentaram um potencial proliferativo superior com taxas de crescimento e population doublings mais elevados. A capacidade cloogénica não parece variar com as passages. A caracterização imunofenotípica não revelou diferenças significativas entre hMSCs de diferentes fontes e todas demonstraram capacidade de se diferenciar em adipócitos, osteócitos e condrócitos. A UCM é uma alternativa viável ao uso de outras fontes para obtenção de hMSCs. Todavia, é necessário desenvolver meios de culturas sem soro e sem factores de origem xenogénica que estejam optimizados para expansão de UCM-hMSCs para uso clínico. O processo de isolamento terá de ser optimizado de forma a isolar um maior número de células por unidade de cordão umbilical.
julho 20, 2011, 14:0
Documentos da dissertação ainda não disponíveis publicamente
Orientação
CO-ORIENTADOR
Cláudia Alexandra Martins Lobato da Silva
Departamento de Bioengenharia (DBE)
Professor Auxiliar
