Dissertação
Interaction of mesenchymal stem/stromal cell-derived exosomes with human cell lines for different biomedical applications EVALUATED
Células Mesenquimais Estaminais/Estromais (MSCs) são células multipotentes caracterizadas pelas suas propriedades biológicas únicas, já exploradas para o tratamento de diversas patologias. No entanto, a maioria das propriedades terapêuticas das MSCs têm vindo a ser relacionadas com o seu secretoma, no qual se incluem os exossomas, pequenas vesiculas membranares que demonstram ter um papel importante na comunicação intercelular e outros processos biológicos. Os mecanismos responsáveis pela função dos exossomas são ainda desconhecidos, assim como o seu potencial para o tratamento de patologias. O principal objectivo deste trabalho foi realizar uma caracterização preliminar da função biológica de exossomas obtidos de MSCs de diferentes tecidos e dadores saudáveis expandidas em bioreatores. Inicialmente, os efeitos destas vesículas sobre a proliferação de duas linhas celulares de adenocarcinoma (MCF-7 e A549) e uma representante da barreira hematoencefálica (hBMEC) foram determinados e um padrão de resposta foi observado para as primeiras. Adicionalmente, a invasão de A549 através de Matrigel foi também avaliada e a presença de exossomas de MSCs demonstrou ser estimulante. Inclusivamente exossomas de controlo foram isolados, para comparação com a actividade funcional de exossomas-MSC, e caracterizados através de análises BCA, NTA e Western Blot. Nas amostras testadas, foram detetadas distribuições de tamanhos e marcadores característicos de exossomas. Por último, a marcação das vesiculas foi experimentada com um anticorpo anti-CD63 conjugado com FITC e três protocolos foram testados e comparados. Estes resultados realçam a possível aplicação de exossomas de MSCs para fins terapêuticos, porém, ainda é necessária uma avaliação dos seus mecanismos de ação mais aprofundada.
novembro 19, 2019, 16:0
Publicação
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Orientação
ORIENTADOR
Departamento de Bioengenharia (DBE)
Professor Auxiliar Convidado
