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Dissertação

RNAi as a tool to inhibit the angiogenic potential of human Mesenchymal Stem/Stromal Cells in malignancy EVALUATED

Detalhes: Células Mesenquimais Estaminais/Estromais (MSC) desempenham um papel crucial na manutenção da homeostase nos tecidos secretando uma vasta gama de moléculas biologicamente ativas. Após a interação com cancro, as MSCs tornam-se participantes ativos no desenvolvimento tumoral, promovendo a angiogénese através da secreção de moléculas como fator de crescimento endotelial vascular (VEGF). Considerando que a angiogénese tumoral uma importante característica na progressão do cancro, o bloqueio da produção de VEGF no microambiente tumoral, poderá retardar o crescimento do tumor. Neste contexto, RNA de interferência (RNAi) é uma abordagem promissora correntemente utilizada na supressão a expressão génica em células de mamíferos. Deste modo, este projeto envolve a transfeção de MSCs derivadas da medula óssea humana e MCF-7 (adenocarcinoma de mama humano), com small interference RNAs (siRNAs) sintéticos ou expressos como um short-hairpin RNAs a partir de um vetor minicírculo, que visam silenciar a expressão de VEGF. Em suma, um silenciamento de 50% e 40% a nível do mRNA de VEGF, após a transfeção de MSCs e MCF-7 com o siRNA, foi observado. Da mesma forma, uma diminuição na secreção de VEGF foi observada. Relativamente aos vetores minicírculo, contrariamente ao esperado, a expressão de VEGF aumentou a nível do mRNA e proteína, após transfeção das duas linhas celulares. Embora sejas requerido mais estudos, estas discrepâncias parentam estar relacionadas com o incorreto processamento do shRNA num siRNA funcional. No geral, este estudo fornece conhecimentos em relação à implementação de um sistema baseado em RNAi que silencia a expressão de VEGF, visando retardar a angiogénese tumoral.
Keywords: Angiogénese tumoral, Células Mesenquimais Estaminais, Fator de crescimento endotelial vascular, RNA interferência

Discussão: novembro 16, 2018, 15:0