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Dissertação

Biofunctionalization of electrospun poly(epslon-caprolactone) nanofibers to promote neural stem cell adhesion, alignment and expansion EVALUATED

Detalhes: Esta tese é motivada pelo interesse em avaliar o uso de biomateriais para cultura de células estaminais neurais (NSC), pelo seu potencial impacto em aplicações clínicas como o tratamento de danos no Sistema Nervoso Central. O electrospinning foi utilizado para produzir scaffolds nanofibrosos de policaprolactona (PCL), que mimetizem a estrutura da matriz extracelular do nicho das NSC in vivo. As propriedades mecânicas e bioquímicas destes desempenham um papel importante na adesão, proliferação e alinhamento das NSC. A adesão celular ao biomaterial é fundamental, por isso, diferentes técnicas de modificação da superfície têm sido realizadas para melhorar as características deste polímero sintético. Neste estudo, a modificação da superfície foi desenvolvida utilizando um procedimento químico simples, que consiste na aminação e reticulação com glutaraldeído para a ligação covalente de biomoléculas. A reacção de aminólise permite a introdução de grupos amina reactivos possibilitando a imobilização das proteínas de adesão, fibronectina e laminina, e da sequência de aminoácidos arginina-glicina-ácido aspártico (RGD). A proliferação das NSC in vitro foi quantificada através do ensaio AlamarBlue, enquanto a sua morfologia foi avaliada por marcação fluorescente com rodamina-faloidina e microscopia electrónica de varrimento. Os resultados obtidos revelam que os scaffolds nanofibrosos funcionalizados promovem a proliferação e alinhamento das células comparando com scaffolds não modificados. Por outro lado, o estudo do efeito do alinhamento e diâmetros das fibras não evidencia diferenças significativas na proliferação das NSC nos scaffolds analisados. As NSC mantêm o seu potencial de diferenciação continuando a expressar nestin (marcador de multipotência) nas condições estudadas.
Keywords: Células Estaminais Neurais, Electrospinning, Matriz Extracelular, Modificação de Superfícies, Moléculas de Adesão, Expansão In Vitro

Discussão: junho 24, 2013, 16:0

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