Dissertação

Kinetic measurement and optimisation of Transaminase within a synthetic two-step pathway for microfluidic applications EVALUATED

Microfluídica é uma relativamente nova tecnologia bastante promissora em campos como a análise. As vantagens por ela oferecidas apenas pelo facto de lidar com ínfimas quantidades de fluido tornam-na extremamente competitiva em relação a outros sistemas de maior escala que necessitem de utilizar compostos raros e dispendiosos. Por esta mesma razão, a microfluídica torna-se o campo de eleição no desenvolvimento de métodos de high-troughput que possam ser utilizados na selecção e optimização de biocatalizadores e das suas condições operatórias. O presente trabalho pretende aplicar tal metodologia através da utilização de um microcapilar de sílica como câmara microreactora para um processo biocatalítico baseado em imobilização enzimática. A reacção modelo em investigação utiliza como biocatalizador a enzima transaminase capaz de sintetizar um amino-diol quiral. As condições operatórias foram optimizadas à microescala (250L) tendo sido obtidos perfis de temperatura e de pH assim como dados cinéticos. A produção do biocatalizador foi também analisada tendo sido identificados pontos passíveis de melhorar o processo. Foi ainda examinada a retenção de actividade da transaminase com o tempo de armazenagem. Por último, a informação obtida permitiu algumas incursões no microcapilar onde as taxas específicas iniciais de reacção mostraram resultados comparáveis aos controlos realizados em microescala.
Microfluidica, enzimas imobilizados, cauda de histidinas, transaminase

Setembro 4, 2007, 10:0

Publicação

Obra sujeita a Direitos de Autor

Orientação

CO-ORIENTADOR

Frank Baganz

University College London

Especialista

ORIENTADOR

Joaquim Manuel Sampaio Cabral

Departamento de Engenharia Química e Biológica (DEQB)

Professor Catedrático