Dissertação

Pesquisa e validação de sondas para identificação de contaminantes microbiológicos exigidos legalmente em amostras de água para consumo EVALUATED

A monitorização dos microrganismos patogénicos existentes na água é da maior importância para assegurar a saúde pública. As técnicas de rotina largamente aceites na avaliação da qualidade microbiológica da água apresentam várias limitações, como elevado tempo de resposta, baixa especificidade, falta de abrangência para muitos patogénicos importantes. O uso de indicadores facilita a análise, apresentando, todavia, limitações na correlação entre a presença de indicadores e patogénicos na mesma amostra. Várias tentativas foram realizadas pela comunidade científica, para encontrar outras formas de detecção de patogénicos. Este estudo pretende desenvolver um método rápido para detectar simultaneamente vários microrganismos (bactérias, protozoários e vírus) em amostras de água, usando um chip de DNA (Aquachip). O início deste trabalho consistiu no desenho de primers específicos para a amplificação de oito sondas de DNA para os microrganismos indicadores e obrigatórios segundo a lei Portuguesa e a Directiva da Comunidade Europeia: Coliformes totais (Sonda 1), Escherichia coli (Sonda 4-E. coli_PT, Sonda 5-E. coli_PMI, Sonda 7-E. coli_uidA e Sonda 8-E. coli_lacZ), Enterococcus (Sonda 2- Enterococcus faecalis e Sonda 3- Enterococcus faecium) e Clostridium perfringens (Sonda 6). O algoritmo Blastn ? Nucleotide Blast (NCBI) mostrou homologia entre cada uma das sondas e os seus microrganismos alvo. Todas as sondas foram validadas pela técnica de Hibridação de Southern. A clonagem das sondas validadas não teve resultados positivos.
Qualidade da água de consumo humano, Microrganismos indicadores, Sondas de DNA, Southern blot, Clonagem

Dezembro 13, 2007, 10:0

Publicação

Obra sujeita a Direitos de Autor

Orientação

CO-ORIENTADOR

Helena Margarida Moreira de Oliveira Vieira

FEUCP ,Campus de Sintra; BIOALVO, SA

Investigador Principal

ORIENTADOR

Luís Joaquim Pina da Fonseca

Departamento de Engenharia Química e Biológica (DEQB)

Professor Auxiliar