Dissertação

Identificação e Discriminação de Bactérias por Fluorescência Intrínseca EVALUATED

Foi testado um novo método com vista à identificação e discriminação de géneros e espécies bacterianos descritos como contaminantes comuns de Medicamentos e Dispositivos Médicos, baseado na medição e consequente Análise Multivariada dos espectros obtidos por Fluorescência Intrínseca dos aminoácidos aromáticos (AAA) em conjunto com ácidos nucleicos (NA) e do triptofano, após excitação a 250 e 270 nm, respectivamente. Foi ainda estudada a possibilidade de se utilizarem dois importantes fluoróforos intracelulares, NADH e FAD, na discriminação de bactérias. O estudo contemplou 14 géneros bacterianos diferentes, cujos espectros de AAA+NA e triptofano foram usados para a construção de um modelo usando Métodos Quimiométricos de Análise de Componentes Principais (PCA), SIMCA e Mínimos Quadrados Parciais Hierárquico (HPLS). O modelo construído foi sujeito a validação externa usando os Métodos SIMCA e HPLS, e seis estirpes anteriormente isoladas de Medicamentos e Dispositivos Médicos. Os resultados obtidos mostram que a técnica de Fluorescência Intrínseca é útil na identificação e discriminação dos diferentes géneros, embora ao nível da espécie os resultados revelem a necessidade da obtenção de novos modelos com mais dados experimentais. A Espectroscopia de Fluorescência mostrou ter inúmeras vantagens, devido à sua elevada sensibilidade, ao rápido tempo de processamento, à facilidade de automação e a não utilização de reagentes específicos. No entanto, para que esta técnica possa de facto ser utilizada no controlo microbiológico de medicamentos é necessário um estudo mais completo, com maior número e variedade de espécies relevantes.
Identificação Bacteriana; Fluorescência Intrínseca; Análise de Componentes Principais; SIMCA; Mínimos Quadrados Parciais.

Junho 21, 2007, 11:0

Documentos da dissertação ainda não disponíveis publicamente

Orientação

ORIENTADOR

Ana Cristina Anjinho Madeira Viegas

Departamento de Engenharia Química e Biológica (DEQB)

Professor Auxiliar